石蜡切片最新视觉报道_石蜡切片和冰冻切片的区别(2024年12月全程跟踪)
石蜡切片常见问题及解决方法(下) 5. 切片碎烂或组织与石蜡分离 组织脱水不彻底,透明度不够。需要根据组织的大小和厚薄调整脱水、透明时间。 浸蜡时间过长或温度过高。根据组织的性质和结构调整浸蜡时间,控制包埋温度。 脱水、透明时间不足,或组织中含有乙醇等,导致石蜡不易渗入组织。应重新熔化,退回入二甲苯和酒精,再进行包埋。 二甲苯使用时间过长,应更换二甲苯。 切片皱褶太多且不能展开 蜡太软或室温过高。可以将蜡块放入冰箱中冰冻后切片,并在切片时一边切片一边用冰块冰冻或换蜡。如果室温过高,可以开空调降低室温。 切片刀上粘有残余的石蜡,刀口不干净。可以用棉花沾少许二甲苯将刀口拭干净。 组织浸蜡时间不够,或脱水、透明不够。可以重复浸蜡过程。 切片刀不锋利。应将切片刀磨锐利再行切片。 材料发生裂隙破碎或脱落 脱水不够彻底,无法弥补。 有透明剂残留,可以增加浸蜡时间,重新包埋。 石蜡渗入时,温度过高或时间过长,无法弥补。 脱水剂和透明剂使组织变硬发脆,可以用正丁醇、叔丁醇和二氧六环等进行脱水和透明。 材料太硬或太粗,可以在蜡块表面涂一薄层火棉胶溶液。
新手必看!H&E染色石蜡切片机全攻略찟 大家好!在开始H&E石蜡组织切片之前,为了确保实验的安全和顺利进行,我们为大家准备了一份详尽的石蜡切片机结构与功能讲解!无论你是实验新手还是经验丰富的达人,这份内容都对你有所帮助哦!赶紧收藏起来吧~ 石蜡切片机结构解析: 切片机主体:负责切片操作的主要部分。 刀片:用于切割石蜡组织的锋利刀片。 夹具:固定石蜡组织的装置。 调节旋钮:控制切片厚度和速度的调节器。 照明灯:提供清晰的视野。 ᠥ能详解: 切片操作:将石蜡组织切成薄片,便于后续染色。 调节厚度:根据需要调整切片的厚度。 调节速度:控制切片的速率,保持切片质量。 固定组织:使用夹具固定石蜡组织,确保切片过程稳定。 实验小贴士: 在进行切片前,请确保石蜡组织已经充分冷却。 切片过程中,保持手部稳定,避免切片变形。 切片后,及时清理切片机,保持设备清洁。 希望这份教程能帮助你更好地掌握石蜡切片的技巧,顺利完成实验!
젧᥈片HE染色实验全攻略 젧𛇥 埋步骤: 乙醇脱水:将组织依次浸泡在70%、80%、90%、95%和100%的乙醇中,各40分钟。注意,骨性和钙化组织需在脱钙液中浸泡24小时。 透明处理:将组织依次浸泡在三个二甲苯中,各1小时。 浸蜡:将组织依次浸泡在三个石蜡缸中,各1小时。 包埋:将液态石蜡倒入模具盒中,将浸好蜡的组织块平放底部,切面朝下,待石蜡凝固后去掉包埋框,完全冷却后修整蜡块。 ꠥ片制作: 将预冷的蜡块固定在石蜡切片机上,使蜡块的切面与刀口平行,刀的倾斜度通常为15度。 调节切片厚度为4微米,切成厚度均匀的切片。 用毛笔轻轻托起切片,放入展片箱中,水温控制在45度左右,待摊平整后捞片。 将切片贴附在载玻片上,放置在65度的烤片机上烤1小时,再放入烘箱内烘烤2小时。 石蜡切片脱蜡至水: 将石蜡切片依次放入二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中各10分钟,再放入无水乙醇Ⅰ、Ⅱ中各5分钟,然后依次放入90%、80%、70%和50%的酒精中各5分钟进行梯度脱蜡。 蠈E染色: 将石蜡切片放入苏木素染液中染色0.5-1分钟,自来水漂洗。 用1%盐酸酒精分化数秒,自来水漂洗。 用1%氨水返蓝1分钟,流水冲洗数秒。 放入伊红染液中染色数秒,流水漂洗。 脱水封片: 将石蜡切片依次放入75%和85%的乙醇中各2分钟,再放入无水乙醇中5分钟两次。 将切片从二甲苯中取出,用中性树胶封片。 结果判读: 细胞核为蓝色,细胞质为红色。
植物甲苯胺蓝染色实验指南 大家好!今天我想和大家分享一下植物甲苯胺蓝染色的实验步骤和心得。这个实验主要用来观察植物细胞壁的颜色变化,特别有趣哦!下面就让我们一起来看看具体步骤吧。 实验步骤 脱水浸蜡 首先,我们要把样品整理好,放进脱水盒里。然后,把这个脱水盒放进脱水机里,依次用不同浓度的酒精进行脱水。具体步骤是:75%酒精4小时,85%酒精2小时,90%酒精2小时,95%酒精2小时,无水乙醇I 1小时,无水乙醇II 1小时。接下来,用醇苯混合液处理5-10分钟,再用二甲苯I和二甲苯II各处理5-10分钟。最后,用62℃的蜡苯混合液处理2小时,然后用融化石蜡I和II各处理4小时。 石蜡包埋 浸好蜡的组织需要转移到包埋机上进行包埋。先在包埋框里加入少量融化石蜡,待蜡凝固之前把样品从脱水盒里取出放入包埋框,并贴上对应的标签。然后,把包埋框放到-20℃的冻台上冷却,待蜡完全凝固后取出蜡块并修整。 石蜡切片 ꊥ🮦𝧚蜡块夹到石蜡切片机上切片,切片厚度为8-10。将蜡带漂浮在40℃的温水上摊平,然后用防脱载玻片将组织捞起。接着,将载玻片放入60℃的烘箱内烤片,直到水烤干蜡烤化为止。 脱蜡至水 犥片依次放入二甲苯I 15分钟,二甲苯II 15分钟,无水乙醇I 5分钟,无水乙醇II 5分钟,85%酒精 5分钟,75%酒精 5分钟,最后用蒸馏水冲洗。 甲苯胺蓝染色 芥𛇥片放入染液中染色2-5分钟,然后用水冲洗。接着用显微镜观察并根据组织着色深浅进行适当的分化或者不分化。最后,用自来水冲洗后将切片放入烤箱内烤干。 透明封片 将切片放入干净的二甲苯中透明处理5分钟,然后用中性树胶封片。 数据采集 在显微镜下采集相关数据。 实验结果 木质化细胞壁呈蓝绿色,纤维素细胞壁呈紫蓝色。结果判读可以参考百度网盘链接哦! 希望这篇实验指南能帮到大家!如果有任何问题或者想法,欢迎在评论区留言哦!
石蜡切片小技巧:避免麒麟臂的实用指南 젥片不散的小妙招 长条样本斜放更好切:竖着切容易散,想象一下刀片和样本的接触面以及施力的方向,斜着放会更稳。 刀片要锋利:一旦切片开裂,赶紧换新刀片,旧刀片可以留着修边时用(偷偷做,别被老板发现)。 젥片不皱的秘诀 冷板冷冻:有条件的话,切片前统一放到冷板上冻,切一个拿一个。 冰袋降温:切的时候整个冰袋,切几刀冰一下就不会皱。皱了的话慢慢放热水里也能展开。记得把切片机调到break并且把安全盖罩上,安全第一,不要意外切到手。 젥悤𝕨𗥾长长的条带 粘镊子上的处理:放水里的时候粘镊子上了,不要慌,疯狂抖手给它颤下去(和asmr的直升机掏耳一个抖法),主打一个高频小幅度震动。 无风环境操作:尽量在无风的环境操作,空调叶片啥的都会有影响。入水的瞬间要是反方向吹一阵风,那条带可能就叠一起了,放到一半来风可能就断了。 젨不吸附的小技巧 玻片正负面:首先确保玻片正负没搞反。 添加粘合剂:水里加点tissue section adhesive。 水温控制:展片水温根据你用的石蜡应该在四十摄氏度左右,水温过高组织会泡散。 如果实在切不好,可能是前期包埋没做好,及时止损融了重来。 有对前期脱水包埋或者后期免疫荧光染色感兴趣的朋友吗?我可以详细写一下。最近刷到好多姐妹发石蜡切片哈哈。
切了个好玩的东西,第一时间以为我有了了不起的发现,第二时间发现自己看错了[允悲]要是能做石蜡切片就好了
茜素红 🢜覜近发现了一种特别的颜色——茜素红,真的是既好看又有故事感。今天就来和大家聊聊这个颜色吧! 🥟짉犨素红是一种有机钠盐和有机磺酸盐,外观是橘黄色的固体粉末,熔点在287-289Ⰳ之间。它的化学结构比较复杂,由多个碳、氢、氧和硫原子组成。在水中溶解度较高,大约为10 mg/mL,而在DMSO中溶解度较低,几乎不溶。 存储方面,建议将茜素红保存在4Ⰳ的避光环境中,因为它对光敏感,容易分解。使用茜素红时,通常需要将其溶解在水中,或者用超声波辅助溶解。它还能与碳酸钙或磷酸钙中的钙盐螯合形成橙红色复合物,常用于钙的染色和比色pH指示剂(3.8-5.4之间)。 쥜觔物学中的应用 在生物学中,茜素红有着广泛的应用。它常被用作非成骨谱系细胞中钙的染剂,通过比色法定量确定成骨谱系细胞钙化沉积的存在。特别是在石蜡切片和冰冻切片中,它表现出色。 石蜡切片脱蜡至水后,用茜素红染液染色5-10分钟,再自来水洗后烤干。切片入干净的二甲苯透明5分钟,最后用中性树胶封片。在显微镜下拍照,钙盐沉积处呈深红色,背景淡红色或者近无色。 訉舘 力 在艺术中,茜素红也有着独特的魅力。它常被用于绘画、染色和摄影等。作为天然色素,它不仅能生动地展现出物体的纹理和光影效果,还具有独特的色彩特性。 例如,传统国画中的“虢国夫人游春图”就使用了茜素红来染色。画中女子的衣裙鲜艳夺目,展现出古代女性的美丽与自信。而现代艺术家们也不乏用茜素红来创作具有质感和纹理的作品,让人感受到这一颜色的独特魅力。 𘥅𖥮,颜色不仅仅是视觉上的享受,更是文化和历史的传承。每次看到这些用茜素红创作的作品,我都会感受到一种特别的情感。大家有没有用过或者见过这种颜色呢?欢迎在评论区分享你的故事和感受哦!
石蜡切片操作指南:从零开始到熟练的秘诀 石蜡包埋是一种在组织学中广泛使用的技术,它能够固定、切片和染色组织样本,便于观察和研究。以下是石蜡包埋的详细步骤和操作技巧: 固定ꊩ斥 ,将组织样本用4%的多聚甲醛固定至少24小时。这一步非常关键,因为它为后续的步骤打下了基础。 取材ꊥ詀风橱内,用手术刀将固定好的组织修平整,并将修切好的组织和对应的标签放入脱水盒中。 脱水犥𑦰放入吊篮中,然后放入脱水机内进行梯度酒精脱水。具体步骤包括:75%酒精4小时,85%酒精2小时,90%酒精2小时,95%酒精1小时,无水乙醇I 30分钟,无水乙醇II 30分钟,醇苯5-10分钟,二甲苯I 5-10分钟,二甲苯II 5-10分钟,蜡I 1小时,蜡II 1小时,蜡III 1小时。 包埋报襌 埋机内进行包埋。先将融化的蜡放入包埋框,待蜡凝固前将组织从脱水盒内取出,按照包埋面的要求放入包埋框并贴上标签。然后将其放入-20Ⰳ的冻台冷却,蜡凝固后将蜡块从包埋框中取出并修整蜡块。 切片ꊥ🮦𝧚蜡块置于石蜡切片机上切片,厚度为3。切片漂浮于40℃的温水中展平,用载玻片将组织捞起,放入60℃的烘箱内烤片。待水烤干、蜡烤化后取出常温保存备用。 脱蜡至水犥片依次放入二甲苯I 10分钟,二甲苯II 10分钟,二甲苯III 10分钟,无水乙醇I 5分钟,无水乙醇II 5分钟,95%酒精5分钟,85%酒精5分钟,75%酒精5分钟,纯水5分钟。 染色芧襯的染色试剂对切片进行染色。 脱水封片犥片依次放入无水乙醇I 5分钟,无水乙醇II 5分钟,无水乙醇III 5分钟,二甲苯I 5分钟,二甲苯II 5分钟,二甲苯III 5分钟中进行脱水透明。将切片从二甲苯中取出稍晾干,用中性树胶封片。 掌握石蜡包埋的步骤和操作技巧,将有助于提高实验的准确性和效率。在操作过程中,需要特别注意温度、时间、试剂浓度等,同时也要注意安全措施,如戴手套、护目镜等。只有这样,才能得到高质量的组织样本,为研究提供可靠的数据和结果。
젧᥈片HE染色全攻略 组织包埋步骤: 乙醇脱水:将组织依次浸泡在70%、80%、90%、95%、100%的乙醇中,各40分钟。注意,骨性和钙化组织需在脱钙液中浸泡24小时。 透明处理:将组织依次浸泡在三个二甲苯中,每缸各1小时。 浸蜡:将组织依次浸泡在三个石蜡缸中,每缸各1小时。 包埋:将液态石蜡倒入模具盒中,将浸好蜡的组织块平放底部,切面朝下。待石蜡凝固后去掉包埋框,完全冷却后修整蜡块。 ꠥ片制作: 将预冷的蜡块固定在切片机上,调节切片厚度为4,切成厚度均匀的切片。 用毛笔轻轻托起切片,放入展片箱中,水温控制在45℃左右。 待切片摊平整后捞片,贴附至载玻片上,放置在65℃烤片机上烤1小时,再放入烘箱内烘烤2小时。 石蜡切片脱蜡: 将石蜡切片依次放入二甲苯Ⅰ10分钟、二甲苯Ⅱ10分钟、二甲苯Ⅲ10分钟、无水乙醇Ⅰ5分钟、无水乙醇Ⅱ5分钟、90%酒精5分钟、80%酒精5分钟、70%酒精5分钟、50%酒精5分钟。 蠈E染色: 石蜡切片入苏木素染0.5-1分钟,自来水漂洗。 1%盐酸酒精分化数秒,自来水漂洗。 1%氨水水溶液返蓝1分钟,流水冲洗数秒。 放入伊红染液中染色数秒,流水漂洗。 砨𑦰片: 石蜡切片依次放入75%乙醇2分钟、85%乙醇2分钟、无水乙醇5分钟、无水乙醇5分钟、二甲苯5分钟透明。 将切片从二甲苯中取出,中性树胶封片。 结果判读: 细胞核为蓝色,细胞质为红色。
젧᥈片HE染色全攻略:步骤与技巧 苏木精-伊红染色法(Hematoxylin-Eosin staining),简称HE染色法,是切片技术中常用的染色方法之一。苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。 ꠥꌦ꤯取样固定 取新鲜的组织样品,加入4%多聚甲醛组织固定液的EP管中。取样材料应该小而薄,约黄豆粒大小。 脱水 采用梯度酒精浓度法脱水。通常选择50%-60%-70%-90%-95%-100%的浓度梯度,各酒精浓度要求准确。95%以前各步骤脱水1小时,95%和100%均分为两步进行,分别脱水30分钟。实验中常将组织在后一步的95%的酒精溶液中过夜,以便进行脱脂。 透明浸蜡 为了使石蜡更容易进入组织,要对脱水后的组织进行透明处理。将组织依次浸入二甲苯:无水乙醇(1:1)溶液和二甲苯透明样品各30分钟,然后在60℃的石蜡溶液中充分浸泡2小时。 包埋和切片 通过包埋机,将浸泡后的组织块使用蜡液包埋后,放到冷台上凝固。之后使用刀片进行修整,在切片机上固定好后进行连续切片(5um)。所得的切片用银子在42℃温水中展开,之后固定在载玻片上,经40Ⰳ烘干后进行HE染色。 HE染色 HE染色的程序如下: 浸入二甲苯ⅠⅡ,95%酒精,90%酒精,80%酒精,70%酒精各15分钟。 二甲苯:100%酒精(1:1),100%酒精Ⅰ,50%酒精,蒸馏水各2分钟。 苏木精染液5-10分钟,水洗后分化入1%盐酸酒精5秒,自来水10分钟。 1%氨水蓝化,自来水,50%,70%,80%,90%和95%酒精各2分钟。 伊红染液5分钟,95%酒精,100%酒精ⅠⅡ,100%酒精:二甲苯(1:1),二甲苯I、各2分钟。 中性树脂封片,不应该等切片上的二甲苯干了再封固。 通过以上步骤,即可完成HE染色,观察到细胞核和细胞质的清晰染色效果。
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